金标银染基因检测方法
发布时间:2022-03-02 16:57:54 点击次数:57 文章作者:
——光学分析中的比色检测法之一。利用物质的光学性质进行化学分析的方法分三种类型:(1)基于发射原理的有发射光谱化学分析、火焰光度分析、荧光X射线光谱分析、荧光分析、原子荧光谱分析等;(2)基于吸收原理的有比色分析、比浊分析、红外线吸收光谱分析、原子吸收光谱分析等;(3)基于其他原理的还有X射线衍射分析、电子显微镜分析以及偏光分析等。金标银染检测原理:纳米技术与DNA检测技术的结合为比色基因检测方法的发展提供了基础。纳米金由于制备简单、粒径可控、生物兼容性好等优点在DNA检测中得到了越来越广泛的应用。纳米金颗粒在盐溶液中很容易聚集,纳米金溶液的颜色对聚集程度非常敏感。Mirkin等将互补的靶DNA加入纳米金标记的探针溶液中,靶序列与探针杂交后在溶液中形成以DNA杂交体为纽带的多个Au纳米粒子构成的纳米金/寡核苷酸网状聚集物,使纳米金颗粒间的距离拉近,溶液颜色由红色变为蓝色。这一方法的检测灵敏度可达10fmol/L。在高浓度靶分子存在下甚至用肉眼就可直接观察到结果。根据不同直径的金纳米粒子产生的散射光不同,可进行寡核苷酸阵列的多色标记和检测。金标银染法检测方法与荧光检测方法相比,选择性可高出3倍,而灵敏度则可提高100倍之多。金标银染基因检测的基本原理,DNA探针末端标记有纳米金颗粒,杂交后,银离子在金颗粒表面沉积,被还原为单质银而呈现出黑色的银染信号。这种信号用肉眼就可观察到,如果用普通的扫描仪扫描后再用相关软件分析信号的灰度,即可得到准确的灰度值。总之,比色分析法具有无辐射,检测仪器简便的优点,并且没有荧光淬灭,近年来已越来越多地用于DNA检测的研究。