——金免疫技术。迄今为止，金标记仍主要用于免疫组织化学中。在免疫测定中，金标记常与膜载体配合，形成特定的测定模式，典型的如斑点免疫渗滤试验和斑点免疫层析试验等，已是目前应用广泛的简便、快速检验方法。具体制备方法如下：1.蛋白质的处理：由于盐类成分能影响金溶胶对蛋白质的吸附，并可使溶胶聚沉，故致敏前应先对低离子强度的水透析。必须注意，蛋白质溶液应绝对澄清无细小微粒，否则应先用微孔滤膜或超速离心除去。一般情况下应避免磷酸根离子和硼酸根离子的存在，因为它们都可吸附于颗粒表面而减弱胶体金对蛋白质的吸附。蛋白质最适用量的选择：将待标记的蛋白质储存液作系列稀释后，分别取0.1ml（含蛋白质5-40ug）加到1ml胶体金溶液中，另设一管不加蛋白质的对照管，5分钟后加入0.1ML10%NaCl溶液，混匀后静置2小时，不稳定的金溶胶将发生聚沉，能使胶体金稳定的最适蛋白量再加10%即为最佳标记蛋白量。3.标记：在接近并略为高于蛋白质等电点的条件下标记是比较合适的，在此情况下蛋白质分子在金颗粒表面的吸附量最大。下述标记步骤最为常见：（1）用0.1mol/LK2CO3或0.1mol/LHCl调节金溶胶至所需pH（标记SPA时调到pH6.0）。（2）于100ML金溶胶中加入最佳标记量的蛋白质溶液（体积为2-3ml），搅拌2-3分钟。（3）加入5ML１%PEG20000溶液。（4）于10000-100000g离心30-60分钟（根据粒径大小选择不同离心条件），小心吸去上清液（切忌倾倒）。（5）将沉淀悬浮于一定体积含0.2-0.5mg/MLPEG20000的缓冲液中，离心沉淀后，再用同一缓冲液恢复，浓度以ALcm/540nm=1.5左右为宜，以0.5mg/ML叠氮钠防腐，置4℃保存。（6）包被后的金溶胶也可浓缩后于SephadexG-200柱进行凝胶层析分离纯化，以含0.1%BSA的缓冲溶液洗脱。通常用IgG包被的金溶胶洗脱液pH为8.2，以Ａ蛋白包被的金溶胶洗脱液为pH7.0。以上操作中应注意，一切溶液中不应含杂质微粒，可用高速离心或微孔滤膜预处理。胶体金具有很高的动力学稳定性，在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢，可放置数年不发生凝聚。影响稳定的因素主要有电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。金溶胶必须有少量电解质作稳定剂，但浓度不宜过高。高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物质促使溶胶凝聚，但一定量的高分子物质反而可增加溶胶稳定性，如蛋白质、葡萄糖、PEG20000等的加入有良好的稳定效果。当金溶胶吸附蛋白质后，溶胶的稳定性随溶液pH而变化，而这种变化又取决于吸附蛋白质的等电点，如ConA，过氧化物酶等，当pH较低时保持稳定，提高pH则显得不稳定，接近等电点或略高时又变得稳定了。标记后的胶体金溶液可用0.2-0.5mg/mlPEG20000作为稳定剂。在4-10℃贮存数月有效，不宜冰冻。贮存中可能会发生程度不同的凝聚，可离心除去。见“免疫胶体金”、“免疫金标记技术”、“胶体金制备”。